Etapes
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Extraction de pollens actuels
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Extraction de pollens anciens
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| 1
Préparation échantillon |
Hacher finement quelques grammes (une cuillère à soupe) de
mousse. |
Hacher finement quelques grammes (un cm3) de tourbe. |
| 2
Destruction de la matière organique. |
Faire bouillir pendant 5 minutes dans un bécher
:
- avec de l'eau et quelques pastilles de potasse .
- ou prendre 5 cm3 de solution de KOH à 10 %.
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Faire chauffer pendant 15 minutes au bain-marie dans
un bécher :
- avec de l'eau et quelques pastilles de potasse .
- ou prendre 5 cm3 de solution de KOH à 10 %.
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| 2 bis
séparation des grains de pollen |
Ajouter une pincée de perborate de sodium
Porter de nouveau à ébullition pendant 5 miniutes. |
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| 3
Filtrer |
Filtrer avec une passoire (ou tamis de maille 160 à 250
micromètres) pour enlever les gros éléments. |
Filtrer avec une passoire (ou tamis de maille 160 à 250
micromètres) pour enlever les gros éléments. |
| 4
Centrifugation |
Centrifuger le filtrat (5 minutes) pour concentrer les
grains de pollen dans le culot. Enlever le surnageant et rincer le culot
avec de l'alcool.
Recommencer la centrifugation (2 minutes) |
Centrifuger le filtrat (10 minutes) pour concentrer les grains de
pollen dans le culot. Enlever le surnageant et rincer le culot à l'eau
distillée.
Recommencer la centrifugation pendant 10 minutes (le rinçage à l'eau
distillée permet de ramener le pH proche de la neutralité)
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| 5
Coloration |
On peut colorer avec de la fuchsine ou de la safranine
et faire un montage, entre lame et lamelle, dans une goutte d'eau. |
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| 6
Montage |
Faire un montage entre lame et lamelle dans une goutte de
glycérine : le mieux est de disposer d'une plaque chauffante pour poser
la lame (la goutte de glycérine reste liquide). Prélever une partie du
culot. |
Faire un montage entre lame et lamelle dans une goutte de
glycérine : le mieux est de disposer d'une plaque chauffante pour poser
la lame (la goutte de glycérine reste liquide). Prélever une partie du
culot. |
| 7
Fixation (facultatif) |
Quand le montage est prêt, fixer le tour de la lamelle avec
du vernis à ongles ou de la colle à rustines. |
Quand le montage est prêt, fixer le tour de la lamelle avec
du vernis à ongles ou de la colle à rustines. |
